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Aplicação de leucócitos patológicos e precursores sanguíneos 'WPC'

A aplicação WPC foi projetada para classificar melhor as amostras inicialmente marcadas como positivas para ‘Blasts/Abn Lympho?’ pela aplicação DIFF. A análise WPC exclui amostras com células possivelmente malignas com grande especificidade, o que resulta na minimização do número de amostras anteriormente identificadas como possivelmente malignas pela análise DIFF. A integração da análise DIFF e WPC permite uma diferenciação ótima entre amostras suspeitas de serem malignas e as suspeitas de serem reativas.

O canal WPC pode classificar amostras suspeitas numa das três categorias claramente definidas: 'reativa', 'suspeita de malignidade' ou 'negativa'. Isso ajuda aos laboratórios a classificar todas as amostras numa dessas categorias, e a caracterizar condições reativas mais detalhadamente uma vez que uma condição maligna foi excluída.

Esta cuidada sinalização ajuda a simplificar e acelerar o fluxo de trabalho no laboratório, reduzindo a necessidade de realizar testes de acompanhamento demorados e caros quando se suspeita duma condição maligna. Além disso, contribui para a redução do trabalho manual (por exemplo, em esfregaços) para a equipa de laboratório, proporcionando uma orientação mais clara sobre quais células patológicas procurar numa amostra específica.

A aplicação WPC requer a presença do canal WPC em unidades específicas dos analisadores das Séries XN e XR, e utiliza a tecnologia de citometria de fluxo e fluorescência.

Com a licença opcional de HPC, o canal WPC pode ser adicionalmente usado para quantificar células progenitoras hematopoiéticas.

Análise WBC com citometria de fluxo e fluorescência

A reação causada pelos reagentes dedicados no canal WPC depende especificamente da composição dos lípidos da membrana. Os leucócitos maduros têm uma composição lipídica da membrana diferente daquela das células imaturas ou reativas, pelo que são mais afetados, deixando as células num estado menos nativo. Isto torna a membrana celular mais permeável ao marcador de fluorescência patenteado que marca o ADN do núcleo na etapa seguinte da reação. Os valores correspondentes ao tamanho da célula, à estrutura interna e ao conteúdo de ácido nucleico estão, portanto, diretamente relacionados com a funcionalidade das células.

Devido à sua composição lipídica da membrana, os blastos não são fortemente permeabilizados pelo reagente de lise. Consequentemente, apresentam sinais de fluorescência relativamente baixos e sinais elevados de luz frontal dispersa, porque permanecem praticamente intactos.

Por outro lado, os linfócitos neoplásicos são mais maduros e as suas membranas são mais facilmente permeáveis, resultando em sinais de fluorescência mais elevados e sinais de luz dispersa para frente mais baixos devido à contração celular. Essas diferenças permitem uma identificação confiável de células suspeitas de malignidade.

A figura abaixo mostra diferentes visualizações dos scattergrams do canal WPC. O aglomerado vermelho no scattergram à esquerda representa uma população de linfócitos anormais, enquanto o scattergram WPC (SSC-FSC) à direita mostra uma população de blastos (cor vermelha) presente na amostra. Além disso, são apresentadas abaixo imagens relacionadas com os scattergrams 3D (apenas da Série XR).

WPC Scattergram

Loading 3D-Element

WPC Blast Scattergram

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A Série XR utiliza sinais provenientes da dispersão de luz laser em dois ângulos (FSC e SSC) e sinais de fluorescência (SFL). Cada célula sanguínea detetada possui valores individuais de coordenadas x, y, z, que representam os sinais FSC, SSC e SFL, respetivamente. Utilizando algoritmos avançados, a Série XR consegue identificar e agrupar tipos de células, especialmente as anormais, com base no tamanho, complexidade interna e conteúdo de DNA/RNA. O resultado dessa análise é refletido nos scattergrams 3D, que podem ser rodados em todas as direções para inspecionar as populações de células a partir de ângulos diferentes.

Benefícios para laboratórios e profissionais clínicos

  • A análise WPC ajuda a minimizar o número de amostras que são finalmente marcadas como potencialmente malignas, simplificando assim o fluxo de trabalho do laboratório ao reduzir a necessidade de testes demorados e caros requeridos quando se suspeita de uma condição maligna.
  • Pode realizar esfregaços com confiança nas amostras certas, sem perder tempo com falsos positivos. A revisão dos esfregaços é agilizada ao concentrar-se em tipos celulares específicos.
  • A análise WPC é realizada como um teste de reflexo automático, proporcionando-lhe mais tempo sem a necessidade de intervenção direta.
  • A medição de células reativas (“Extended Inflammation Parameters”, licença opcional), proporciona aos clínicos uma compreensão mais aprofundada do estado da resposta imunitária, especialmente após terem excluído condições malignas especificamente com a análise WPC.
  • Com a licença opcional de HPC, torna-se possível quantificar as células progenitoras hematopoiéticas, acrescentando valor ao serviço laboratorial que suporta transplantes de células estaminais hematopoiéticas (HSCT) localmente, ao identificar o momento ideal para os procedimentos de aférese.
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