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A aplicação opcional de contagem de reticulócitos “RET”

A aplicação RET nos analisadores hematológicos diferenciais de cinco componentes da Sysmex utiliza um canal de análise dedicado para a quantificação de reticulócitos (RET; contagem absoluta e percentual), e também quantifica reticulócitos maduros e imaturos com facilidade. Além da contagem RET, fornece a fração de reticulócitos imaturos (IRF - Immature Reticulocyte Fraction) e uma notável variedade de parâmetros adicionais que demonstraram* considerável valor no suporte ao diagnóstico de alterações de eritrócitos. Em particular, a aplicação RET fornece um valioso suporte no diagnóstico da anemia. A combinação apropriada de parâmetros destaca a imagem completa da eritropoiese e o seu desenvolvimento subsequente.

RET-He é um dos parâmetros clínicos avançados derivados da análise RET. Ele quantifica a hemoglobinização dos reticulócitos e tem se mostrado superior a todos os parâmetros relacionados aos eritrócitos maduros*.

Outros parâmetros de interesse da aplicação RET abrangem eritrócitos hipo e hipercrómicos (HYPO-He / HYPER-He), a diferença na hemoglobinização dos reticulócitos em comparação com todos os eritrócitos (Delta-He), o índice de produção de reticulócitos (RPI)** e os eritrócitos fragmentados (FRC)**.

Se deseja ir além dos parâmetros sanguíneos e otimizar o fluxo de trabalho de suas amostras de hematologia, associe a aplicação RET com o Extended IPU:

Pode haver diversas razões por trás dum aumento no MCHC, algumas relacionadas a verdadeiras alterações nos eritrócitos, enquanto muitas outras decorrem de interferências na medição. A aplicação opcional CBC-O**, baseado na investigação de Berda-Haddad et al. e incorporada no Extended IPU, pode apoiá-lo eficazmente. Fornece informações conclusivas sobre a causa da interferência, sugere a substituição dos parâmetros afetados por seus equivalentes na análise RET (por exemplo, RBC-He, RBC-O**, HGB-O**), e recalcula automaticamente os índices de eritrócitos. O uso do canal RET juntamente com o CBC-O reduz a necessidade de procedimentos manuais desnecessários para essas amostras.

O conjunto de regras (opcional) RBC Defect Workflow Optimisation (RWO)** no Extended IPU integra o conjunto de regras CBC-O, a pontuação de RBC e os parâmetros avançados de RBC e RET. O algoritmo inteligente de dois etapas, baseado na investigação de Nivaggioni et al.* e Berda-Haddad et al.*, tem como objetivo apoiar a identificação de doentes com doenças hereditárias dos eritrócitos e anemia por deficiência de ferro (IDA). Permite melhorar o fluxo de trabalho laboratorial encaminhando amostras suspeitas de doenças hereditárias dos eritrócitos para os testes respetivos que podem confirmar o diagnóstico e, ao mesmo tempo, exclui corretamente amostras de IDA que podem gerar resultados errados.

Análise de células sanguíneas (incluindo reticulócitos) com citometria de fluxo e fluorescência

No canal RET, um reagente específico perfura levemente as membranas celulares dos eritrócitos e das plaquetas, permitindo que o marcador de fluorescência penetre nas células enquanto as mantém amplamente intactas. O marcador de fluorescência etiqueta os ácidos nucleicos e outros componentes dos reticulócitos e das plaquetas, sendo que a intensidade do sinal de fluorescência resultante é diretamente proporcional ao conteúdo de ácido nucleico.

Os reticulócitos emitem um sinal de fluorescência mais elevado do que os eritrócitos maduros, que não contêm mais RNA. Usando principalmente o sinal de fluorescência para diferenciação, juntamente com a luz dispersa para frente, os reticulócitos podem ser separados dos eritrócitos maduros e das plaquetas, sendo exibidos adequadamente no scattergram RET.

De acordo com a intensidade de fluorescência, os reticulócitos são fracionados em três categorias:

  • LFR (low-fluorescence ratio) 
  • MFR (medium-fluorescence ratio) 
  • HFR (high-fluorescence ratio) 

O IRF reflete a proporção de reticulócitos imaturos e é calculado a partir da soma de MFR mais HFR.

A aplicação RET também fornece a contagem ótica de plaquetas (PLT-O), já que as plaquetas também contêm RNA intracelular. A medição reflexa automatizada é implementada para amostras com contagens de plaquetas por impedância (PLT-I) não confiáveis, uma vez que o uso de citometria de fluxo e fluorescência resolve muitas interferências PLT-I que são baseadas em sobreposições de volume.

Para obter mais informações sobre como os parâmetros clínicos avançados mencionados anteriormente são derivados e determinados, e como podem ser utilizados, visite os sites dedicados aos “Sysmex parameters”.

A figura abaixo mostra o scattergram do canal RET com uma distribuição normal de células.

Loading 3D-Element

A Série XR utiliza sinais provenientes da dispersão de luz laser em dois ângulos (FSC e SSC) e sinais de fluorescência (SFL). Cada célula sanguínea detetada possui valores individuais de coordenadas x, y, z, representando os sinais FSC, SSC e SFL, respetivamente. Utilizando algoritmos avançados, a Série XR consegue identificar e agrupar tipos de células, especialmente células anormais, com base no tamanho, complexidade interna e conteúdo de DNA/RNA. O resultado dessa análise é refletido nos scattergrams 3D, que podem ser rodados em todas as direções para inspecionar as populações celulares de diferentes ângulos.

Benefícios para laboratórios e profissionais clínicos:

  • Determinação rápida da eritropoiese utilizando diagnósticos de rotina.
  • A informação integrada dos parâmetros RET relacionados à quantidade e à qualidade, fornece uma imagem abrangente da eritropoiese e do seu desenvolvimento adicional.
  • O perfil RET pode ser analisado no modo de sangue total (padrão) assim como no modo pré-diluído. Isso ajuda em amostras que contenham volumes sanguíneos muito baixos.
  • Uma contagem ótica de plaquetas (PLT-O) faz parte da análise de reticulócitos usando citometria de fluxo e fluorescência, a qual resolve muitas interferências que afetam a contagem de plaquetas por impedância (PLT-I). Portanto, é implementada como uma análise reflexa automatizada para amostras com contagens PLT-I não confiáveis.
  • A aplicação opcional CBC-O** do Extended IPU melhora consideravelmente o fluxo de trabalho para amostras com aumento de MCHC, pois reduz os procedimentos manuais para encontrar a causa raiz da anormalidade.
  • A aplicação opcional RWO** do Extended IPU oferece uma oportunidade para otimizar o fluxo de trabalho do laboratório e auxiliar na escolha dos testes confirmatórios apropriados para amostras suspeitas de doenças dos eritrócitos.
  • Quando comparado com o valor de hemoglobina ou outros parâmetros de eritrócitos, o valor de RET-He e integrações avançadas de parâmetros proporcionam uma visão consideravelmente mais rápida das alterações no status eritropoético, auxiliando os clínicos no controle da terapia com ferro e/ou eritropoietina.
  • Suporta a hipótese de monitoramento próximo da terapia, que é necessário por exemplo em doentes em diálise, ou ajuda os clínicos a identificar rapidamente uma anemia emergente como um efeito colateral, ou mesmo a recuperação durante um processamento bem-sucedido.
  • O IRF é um indicador de eritropoiese e correlaciona-se bem com o enxerto de neutrófilos, conforme publicado* por investigadores. Também foi incorporado a algoritmos para screening de doentes com esferocitose hereditária*.

 

 

* Para referências a publicações independentes, por favor, visite o nosso publications ou entre em contato com o representante local da Sysmex.
Para os white papers da Sysmex, por favor, visite o nosso Scientific documents library

** Parâmetro de Investigação / Apenas para uso em investigação

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