OSNA® es la abreviación de One- Step Nucleic Acid Amplification. El método implica el análisis molecular de la citoqueratina 19 (CK19) en el ARNm del ganglio linfático, a partir de una técnica de amplificación denominada RT-LAMP (Reverse Transcription- Loop Mediated Isothermal Amplification).

¿Cómo funciona la reacción de LAMP?

LAMP (Loop mediated Isothermal Amplification) es un método de amplificación simple, rápido y específico desarrollado por Eiken Chemical Co., Ltd. Se caracteriza por el uso de 6 primers diferentes diseñados específicamente para reconocer 6 u 8 regiones distintas de la secuencia. La reacción funciona a través una ADN polimerasa a una temperatura constante de 65ºC aproximadamente. La amplificación y detección de la secuencia se pueden complementar en un único paso.

¿Cuáles son las características de OSNA®?

Este método se caracteriza por:

Trascripción inversa de mRNA y amplificación de cDNA sin ningún paso de purificación.
Amplificación isotérmica (65°C).
Tiempo de amplificación de 11 minutos por muestra.
Seis primers diferentes, que proporcionan una alta especificidad.
Detección a tiempo real.

¿Cuántas muestras se pueden analizar simultáneamente?

Hasta 14 muestras por cada análisis.

Preguntas y respuestas acerca de la técnica OSNA®

¿Puede almacenarse el ganglio linfático lisado restante?

Sí, a una temperatura de -80ºC o en nitrógeno líquido.

¿La tinción azul puede interferir en la reacción del método OSNA®?

La tinción azul usada en la identificación quirúrgica de los ganglios centinelas no tiene ningún impacto en el resultado del método OSNA®.

Preguntas y respuestas acerca de los reactivos

¿Cuál es la temperatura de almacenamiento de los reactivos (Lynorhag y Lynoamp)?

Los reactivos de homogenización (Lynorhag) deberían almacenarse de 2 a 8 ºC y el kit para la amplificación (Lynoamp) a -20ºC.

¿Cuántas veces se pueden congelar y descongelar los primers y las soluciones control y de calibración?

Las soluciones se pueden congelar y descongelar hasta 5 veces.