O carcinoma urotelial, também conhecido como carcinoma das células epiteliais de transição (TCC), é o tipo mais comum de cancro da bexiga. Começa nas células uroteliais que revestem o interior da bexiga, e o seu diagnóstico inicial muitas vezes coincide com a presença de sintomas relacionados em estádios posteriores do crescimento do tumor. Tal afeta negativamente a probabilidade de cura e requer procedimentos invasivos, como resseção parcial ou completa da bexiga. Uma vez que o carcinoma urotelial apresenta uma elevada taxa de remissão, a monitorização rigorosa de doentes tratados é obrigatória, até quatro cistoscopias invasivas por ano.

A deteção de células urinárias atípicas usando o parâmetro de pesquisa Atyp.C tem o potencial de detetar células malignas em estádios iniciais e reduzir cistoscopias invasivas desnecessárias.

Células urinárias atípicas

Células atípicas com alterações ou células suspeitas de malignidade são libertadas dos tecidos uroteliais através da exfoliação e apresentam uma ou outra característica morfológica, que pode incluir:

Núcleo aumentado > 25 µm
Aumento da razão N:C (núcleo/citoplasma) > 80%
Forma irregular
Hipercromasia
Padrões irregulares de cromatina
Hipertrofia nucleolar > 5 µm
Aumento no número de nucléolos
Forma irregular do núcleo
Aspeto de massas celulares

Como detetar células atípicas na urina?

A citometria de fluxo urinário utiliza fluorocromos específicos para a marcação de estruturas de superfície e conteúdo de ácido nucleico de partículas celulares urinárias. As células marcadas são injetadas numa célula de fluxo após focagem hidrodinâmica para permitir a deteção de células individuais e garantir elevada exatidão.

Após análise por dispersão de luz laser provocada pelas estruturas celulares internas, volume celular e características nucleares, o resultado são sinais de emissão dependentes de partículas, que são então atribuídos a um Scattergram 3D. Através de algoritmos dedicados, as células detetadas são identificadas e quantificadas.

O parâmetro de investigação Atyp.C permite a deteção de células urinárias atípicas como indicador de malignidade urotelial. Características celulares como tamanho, núcleos aumentados e uma maior razão núcleo/citoplasmática são consideradas para separar as células atípicas das células nucleadas não atípicas, como os glóbulos brancos e as células epiteliais de transição.

Atyp.C é um parâmetro de investigação na UF-Series e permite a deteção de células urinárias atípicas e a diferenciação das células não atípicas através da citometria de fluxo urinário em correlação com um aumento do conteúdo de ácido nucleico.

Workflow of the Atyp.C parameter on the UF-Series — Fluxograma do parâmetro Atyp.C na UF-Series

Diagnóstico do cancro da bexiga em investigação

Aydin et al. demonstraram o potencial da UF-Series na deteção de doenças malignas uroteliais num caso de carcinoma urotelial de forte grau recorrente num doente em ambiente de ambulatório. A utilização do microscópio automatizado UD-10 apoiou essas descobertas.

Tınay et al. revelaram o potencial para evitar cistoscopias invasivas no lado do doente e poupar custos com tratamentos desnecessários numa população de estudo heterogénea. Com uma sensibilidade aceitável de 75% e uma especificidade de 100%, o UF-5000 demonstrou um potencial valor para decisões diagnósticas em doentes com cancro da bexiga não-músculo invasivo (NMIBC) de baixo risco. Para doentes com cancro da bexiga não-músculo invasivo de risco elevado, os valores de sensibilidade e especificidade são mais baixos, mas comparáveis ou até melhores, quando comparados com a citologia.

Ren et al. demonstraram o poder preditivo do Atyp.C para doentes com um diagnóstico suspeito de carcinoma urotelial. Os resultados do Atyp.C estiveram de acordo com a citopatologia em 73% dos casos investigados. Em conclusão, o Atyp.C pode ser usado como teste complementar para carcinomas uroteliais no contexto de diagnóstico urinário de rotina, para identificar doentes de risco elevado para um seguimento e tratamento médico mais específicos.

Caso de Doente 1

Atyp.C na deteção de cancro da bexiga

Um doente do sexo masculino de 71 anos acorreu à clínica com diversos sintomas, incluindo fadiga, febre, dor abdominal e macro-hematúria. Foram realizados vários testes, incluindo a análise de uma amostra de urina fresca.

Os resultados da análise de urina de rotina realizada no UF-5000 confirmaram uma macro-hematúria com uma contagem de eritrócitos de 3.989 células/µl. A informação relativa aos eritrócitos “Dysmorphic RBC?” (eritrócitos dismórficos?) indica uma origem não glomerular para a hematúria. Além disso, a presença de 1.649 células bacterianas/µl indica uma infeção bacteriana do trato urinário, acompanhada por uma leucocitúria ligeira, como destacado pela contagem de leucócitos de 289 células/µl. O UF-5000 também detetou células atípicas através do parâmetro de investigação Atyp.C a uma concentração de 3,8 células/µl. Todas as conclusões foram confirmadas pelo dispositivo de imagem automatizado UD-10.

Com base nestas conclusões de diagnóstico e informações da anamnese do doente, que realçaram uma idade acima de 70 anos, mais de 40 anos de tabagismo pesado e trabalho anterior na indústria química, foi realizada uma cistoscopia. Finalmente, a cistoscopia revelou a presença de estruturas papilares que se projetavam no lúmen da bexiga, levando ao diagnóstico de cancro da bexiga.

Resultados numéricos da urinálise — Fig. 1,1: Resultados numéricos da análise de urina no UF-5000 para um doente com indicação de hematúria severa, leucocitúria ligeira, infeção bacteriana do trato urinário e carcinoma urotelial.

Fig. 1,2: Imagem do scattergram, destacando a presença de um grande número de eritrócitos isomórficos, indicando uma hematúria severa de origem não glomerular.

Fig. 1,3: Imagem do scattergram, destacando a presença de leucócitos e células atípicas em baixas concentrações, indicando uma leucocitúria ligeira e suspeita de doença urotelial maligna.

Fig. 1,4: Imagem do scattergram, destacando a presença de células bacterianas, indicando uma bacteriúria com a suspeita de participação de bactérias Gram negativas.

Caso do doente 2

Atyp.C na vigilância do cancro da bexiga

Um doente do sexo masculino de 75 anos apresenta-se ao seu médico de clínica geral para um check-up de rotina. Tem antecedentes médicos de diabetes tipo 2 e foi tratado de um cancro da bexiga não músculo invasivo há três anos. O tumor foi então removido por ressecção transuretral. A vigilância contínua do cancro da bexiga por cistoscopia, realizada pela última vez há nove meses, não revelou qualquer recidiva do tumor da bexiga.

A urinálise normalizada por citometria de fluxo urinário no UF-5000 revelou ligeiros indícios de hematúria de origem não glomerular e leucocitúria pela presença de 107 hemácias/µL e 221 leucócitos/µL, respetivamente. Não havia indicação de infeção bacteriana do trato urinário. No entanto, as células atípicas, que foram detectadas pelo parâmetro de investigação Atyp.C, estavam presentes numa concentração de 5,2 células/µL.

Com base nos achados diagnósticos e na presença prévia de carcinoma urotelial, foi efectuada uma cistoscopia que confirmou a recorrência de um tumor vesical pela presença de estruturas papilares.