Guías Europeas de Uroanálisis 2023: Bloque 5 - parte 1- Química
5.1. Análisis visual y olor de la orina
La orina normal suele tener un olor suave. Un color u olor anormal de la orina no indica patología si está relacionado con la ingesta de alimentos o medicamentos. La orina infectada puede tener olor a amoníaco o ser fétida. Algunas enfermedades metabólicas presentan olores característicos en la orina.
5.2. Tiras reactivas multi-paramétricas
La primera medición del análisis de orina se realiza a menudo utilizando una tira reactiva.
El objetivo de la tira reactiva múltiple es realizar análisis químicos de rutina en una sola operación, con mayor rendimiento diagnóstico o pronóstico.
5.2.1. Infección urinaria: bacteriuria y piuria
La combinación de un resultado positivo para nitritos o leucocitos suele ser lo más útil para la detección, ya que la prueba de nitritos tiene alta especificidad, mientras que la esterasa leucocitaria mejora la sensibilidad.
No se requieren pruebas de laboratorio para pacientes mujeres no embarazadas, sanas por lo demás, con síntomas esporádicos de ITU inferior no complicada.
NO se recomiendan las tiras reactivas para el diagnóstico de infecciones urinarias recurrentes o complicadas.
La fiebre con dolor en el costado indica una posible infección urinaria superior (pielonefritis). Estos pacientes deben ser evaluados con:
- análisis de partículas urinarias,
- cultivo bacteriano,
- proteinuria,
- tasa de filtración glomerular (TFG).
Se recomienda medir la concentración de orina (densidad relativa, conductividad u osmolalidad) en pacientes pediátricos para evitar falsos negativos en muestras diluidas.
5.2.2. Hematuria
Las causas se clasifican en prerrenales, renales y posrenales.
5.2.3. Proteinuria
La prevalencia de proteinuria, detectada con una tira reactiva superior a 200 mg/L (que La prevalencia de proteinuria detectada por tira reactiva (>200 mg/L) es de aproximadamente 2 % en adultos.
Se sugiere la detección selectiva de albuminuria moderada (microalbuminuria) en grupos de alto riesgo, como pacientes con diabetes o hipertensión.
5.2.4. Medidas de la concentración de orina en la tira
Densidad relativa (término oficial de nomenclatura: masa volumétrica relativa; término anterior: gravedad específica). Los resultados de todas las mediciones químicas y análisis de partículas de muestras de orina única deben relacionarse con el estado de excreción de agua (tasa de volumen, diuresis) para permitir interpretaciones clínicas adecuadas. La densidad relativa obtenida con la tira reactiva química es una estimación aproximada de la concentración de orina.
Creatinina: La medición de creatinina se ha utilizado tradicionalmente para estimar las tasas de excreción relacionando las concentraciones urinarias de proteínas, hormonas u otros analitos con las del agua en muestras de orina única. Se han introducido nuevas aplicaciones para las tiras reactivas que miden con sensibilidad la relación albúmina/creatinina en la orina de los pacientes.
5.2.5. Test relacionados con diabetes y otras condiciones metabólicas
- Glucosa: Los análisis de las concentraciones de glucosa en orina han sido reemplazados en gran medida por mediciones de la concentración de glucosa en sangre. NO es una herramienta de detección sensible para la diabetes.
- Cuerpos cetónicos: Los cuerpos cetónicos (acetoacetato, beta-hidroxibutirato y acetona) se excretan en la orina en casos de acidosis diabética, ejercicio intenso, ayuno, inflamaciones entéricas o vómitos. La cetosis también se puede generar mediante la ingesta de dietas cetogénicas.
- pH: El pH urinario varía entre 5 y 9. La orina concentrada de la mañana suele ser ácida, con un pH cercano a 6. La orina de los niños suele ser alcalina. Las bacterias metabolizadoras de urea transforman la urea en amoníaco y pueden aumentar el pH de la orina, alcalinizándola. La supervivencia de los leucocitos puede verse reducida en orinas diluidas y alcalinas, típicamente en niños con ITU. Las mediciones del pH urinario son necesarias para el diagnóstico de alteraciones del equilibrio ácido-base o para el seguimiento de enfermedades específicas.
- Pigmentos biliares: Las mediciones de las concentraciones urinarias de urobilinógeno y bilirrubina han perdido su relevancia clínica para la detección de enfermedades hepáticas tras la aplicación de análisis de sangre modernos con mejor rendimiento diagnóstico.
- Ácido ascórbico: Debido a que muchos pacientes ingieren vitamina C en grandes cantidades (> 1 g/día), la medición de la concentración de ácido ascórbico en la orina ayuda a identificar a aquellos pacientes propensos a obtener resultados falsos negativos en las tiras reactivas.
5.3. Procedimientos de medida
5.3.1. Principios de detección
Leucocitos (WBC, Esterasa): La sensibilidad analítica de la tira de esterasa es de aproximadamente el 80-90 % con un límite de detección de 20×106 WBC/L frente al recuento visual o automatizado de muestras frescas sin centrifugar. Las células lisadas se clasifican como negativas en el recuento de partículas, pero muestran actividad enzimática en la tira reactiva, lo que reduce la especificidad observada.
Bacterias (nitritos): El análisis de nitritos se basa en la actividad del nitrato reductasa, presente en la mayoría de los bacilos uropatógenos gramnegativos, como E. coli. Sin embargo, el nitrato reductasa está ausente en Pseudomonas aeruginosa y en uropatógenos grampositivos como Enterococcus spp. y Staphylococcus spp., y, por lo tanto, no se detectará independientemente de su concentración urinaria. Se informa que la sensibilidad analítica del método varía entre el 20 y el 80 % frente al cultivo, dependiendo de la población de pacientes y del límite de corte para el cultivo positivo.
Eritrocitos: La presencia de glóbulos rojos (RBC), hemoglobina o mioglobina en la orina se observa en forma de puntos (células) o con un color homogéneo en la almohadilla reactiva. La especificidad de la detección de glóbulos rojos con una prueba de tira reactiva se reduce en comparación con el recuento de partículas debido a que los glóbulos rojos se lisan fácilmente en la orina y, ocasionalmente, las muestras de orina contienen hemoglobina de hemólisis in vivo o mioglobina de rabdomiólisis.
Proteína: La proteína urinaria total es una mezcla de proteínas de alto peso molecular (p. ej., albúmina, transferrina, inmunoglobulinas intactas, α2-macroglobulina) y de bajo peso molecular (p. ej., α1-microglobulina, proteína fijadora de retinol, cadenas ligeras de inmunoglobulina) tamizadas del plasma, proteínas secretadas por el riñón (proteína uromucoide o de Tamm-Horsfall) y Las derivadas del tracto urinario. El campo de la tira reactiva tradicional tiene una sensibilidad del 90 al 95 % a la albuminuria clínica a una concentración de aproximadamente 200 mg/L de proteína o 100 mg/L de albúmina.
Albúmina, procedimiento sensible en la tira: Para la detección temprana del daño glomerular, se han introducido procedimientos inmunoquímicos sensibles. Las tiras sensibles deben alcanzar un límite de cuantificación de 10 mg/L de albúmina (o un cociente albúmina-creatinina de 3 mg/mmol) para que el cribado de albuminuria moderada sea válido para la detección de nefropatía incipiente.
Densidad relativa (término antiguo: gravedad específica; término oficial: masa volumétrica relativa): La medición convencional en una tira reactiva múltiple depende de la reacción de intercambio iónico con los polielectrolitos presentes en la almohadilla de la tira, que tienden a proporcionar densidades de orina falsamente altas y bajas, incluso después de la corrección del pH. Las mediciones refractométricas utilizadas por los analizadores automáticos de tiras reactivas en el laboratorio son menos propensas a ese error.
Creatinina: Los procedimientos de fijación de colorantes para determinar la concentración de creatinina en la orina en una tira reactiva incluyen la formación de complejos con iones Cu2+ añadidos con un colorante oxidable, una reacción de quelato o la fijación de colorantes con ácido dinitrobenzoico.
Glucosa: Las mediciones enzimáticas suelen basarse en la reacción de la glucosa oxidasa, que es casi cuantitativa. El rendimiento analítico de la medición de glucosa en escala ordinal suele satisfacer las necesidades clínicas.
Cuerpos cetónicos: La reacción del nitroprusiato (prueba de Legal) no detecta el cuerpo cetónico más importante, el betahidroxibutirato, pero puede utilizarse para detectar estados de cetosis debidos a diversas causas. Las reacciones inespecíficas, la falta de material de referencia suficiente y la imprecisión en la detección dificultan la interpretación clínica de este análisis.
pH: El pH de la orina se mide con un par de colorantes indicadores sensibles al pH. La precisión, de 0,5 a 1 unidad de pH, suele obtenerse en los programas de Evaluación Externa de Calidad.
Ascorbato: El ácido ascórbico (vitamina C) interfiere con la medición de varios analitos en las tiras reactivas. Su medición específica puede mejorar la detección de falsos negativos en muestras de pacientes.
5.3.2. Analizadores para el análisis de tiras reactivas
Se recomiendan instrumentos (en lugar del ojo humano) para leer varias tiras reactivas.
Los laboratorios centralizados que ofrecen un servicio 24 horas tienden a automatizar el análisis de un gran número de muestras, mientras que los centros de urgencias muestran un creciente interés en mejorar la calidad de sus investigaciones con pacientes individuales. El análisis de orina automatizado busca mejorar la precisión y exactitud de los resultados a un nivel superior al alcanzado por los métodos semiautomatizados tradicionales. Los sistemas automatizados deben verificarse con procedimientos de referencia cuantitativos, utilizando sus propias reflectancias cuantitativas en las comparaciones de mediciones.
5.4. Especificaciones de las tiras reactivas
Al verificar el rendimiento de un analizador de tiras reactivas, se prefieren las señales cuantitativas (reflectancias originales) a las concentraciones arbitrarias de la escala ordinal categorizada, para poder visualizar las imprecisiones observadas en las lecturas de reflectancia.
5.4.1. Veracidad en la escala de cantidades ordinales
El límite de detección se creó multiplicando los límites superiores de referencia saludables aproximados de las concentraciones en la orina matutina por un factor de 2, para evitar la positividad transitoria en la zona gris debido a la variación intraindividual (biológica). La veracidad de la medición en escala ordinal puede expresarse utilizando un límite de detección (LdD) y un límite de confirmación (LdC) de la medición de comparación.
La relación entre las concentraciones LdC/LdD es de aproximadamente cinco, según la experiencia sobre la precisión de las mediciones de reflectancia. Estas delimitan una zona gris.
Por debajo del límite de detección, un análisis con tira reactiva debería ser negativo, mientras que, por encima del límite de confirmación, debería ser positivo. En la zona gris, debería producirse una transición gradual de resultados negativos a positivos.
5.4.2. Análisis de concordancia
El rango positivo bajo (1+) es más importante que el rango positivo alto (3+) en los exámenes rápidos de detección de positividad. Se recomienda establecer un control de calidad interno mediante el uso de valores de reflectancia continuos de reflectómetros organizados como tablas de control de calidad de Levey-Jennings. Esto permite verificar la reproducibilidad y el seguimiento rutinario de las mediciones.
Las diluciones de soluciones de control (con tampón o pool de orina humana negativa) ayudan a monitorear el rendimiento a bajas concentraciones si no se dispone de una solución de control positivo bajo estable. Sin embargo, dado que la almohadilla de una tira reactiva influye en la reflectancia medida, se prefiere una solución de control positivo bajo comercial para el reflectómetro correspondiente, ya que la dilución de una solución de control altamente positivo con tampones acuosos puede generar una incertidumbre inesperada.
